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抑肽酶(AP)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)

ELISA Kit for Aprotinin (AP)

BPTI; Trasylol; Pancreatic Trypsin Inhibitor; Basic protease inhibitor

  • 抑肽酶(AP)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)產品包裝(模擬)
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  • 抑肽酶(AP)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)實驗結果圖
  • CEA968Po.jpg標準曲線圖
  • Certificate通過ISO 9001、ISO 13485質量體系認證

特異性

本試劑盒用于檢測抑肽酶(AP)，經檢測與其它相似物質無明顯交叉反應。
由于受到技術及樣本來源的限制，不可能完成對所有相關或相似物質交叉反應檢測，因此本試劑盒有可能與未經檢測的其它物質有交叉反應。

回收率

分別于定值血清及血漿樣本中加入一定量的抑肽酶(AP)（加標樣品），重復測定并計算其均值，回收率為測定值與理論值的比率。

樣本回收率范圍(%)平均回收率(%)
serum(n=5)91-9894
EDTA plasma(n=5)94-10599
heparin plasma(n=5)95-103101

精密度

精密度用樣品測定值的變異系數(shù)CV表示。CV(%) = SD/mean×100
批內差：取同批次試劑盒對低、中、高值定值樣本進行定量檢測,每份樣本連續(xù)測定20 次，分別計算不同濃度樣本的平均值及SD值。
批間差：選取3個不同批次的試劑盒分別對低、中、高值定值樣本進行定量測定，每個樣本使用同一試劑盒重復測定8次，分別計算不同濃度樣本的平均值及SD值。
批內差： CV<10%
批間差： CV<12%

線性

在定值血清及血漿樣本內加入適量的抑肽酶(AP)，并倍比稀釋成1:2，1:4，1:8，1:16的待測樣本，線性范圍即為稀釋后樣本中抑肽酶(AP)含量的測定值與理論值的比率。

樣本1:21:41:81:16
serum(n=5)86-99%84-91%78-103%82-101%
EDTA plasma(n=5)79-98%90-98%80-98%89-99%
heparin plasma(n=5)84-96%96-105%95-104%80-92%

穩(wěn)定性

經測定，試劑盒在有效期內按推薦溫度保存，其活性降低率小于5%。
為減小外部因素對試劑盒破壞前后檢測值的影響，實驗室的環(huán)境條件需盡量保持一致，尤其是實驗室內溫度、濕度及溫育條件。其次由同一實驗員來進行操作可減少人為誤差。

實驗流程

1. 實驗前標準品、試劑及樣本的準備；
2. 加樣（標準品及樣本）50µL，
    加入50µL檢測液A(臨用前配制);
    37°C溫育1小時。
3. 洗板3次；
4. 加檢測溶液B100µL，37°C孵育30分鐘；
5. 洗板5次；
6. 加TMB底物90µL，37°C孵育10-20分鐘；
7. 加終止液50µL，立即450nm讀數(shù)。

實驗原理

本試劑盒應用競爭抑制酶聯(lián)免疫分析法測定標本中待測物質水平。將抑肽酶(AP)單克隆抗體包被微孔板，制成固相載體，往包被抗體的微孔中同時加入生物素標記的抗原和待測抗原(標準品或樣本)，待測抗原與生物素標記抗原對特異性抗體進行競爭結合。溫育后經洗滌去掉未結合物，然后加入HRP標記的親和素，經過溫育和徹底洗滌后加入底物TMB顯色。TMB在過氧化物酶的催化下轉化成藍色，并在酸的作用下轉化成最終的黃色。待測標本濃度越高，標記抗原和抗體的結合就越受到抑制，顯色愈淺。顯色的深淺與酶量呈正相關，而與樣品中待測物質含量呈負相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度（O.D.值），計算樣品濃度。

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參考文獻

雜志參考文獻
24Aprotinin prevents proteolytic epithelial sodium channel (ENaC) activation and volume retention in nephrotic syndrome.[pubmed:29042083]
Aus der Medizinischen Universit?tsklinikdiss_Menacher word[]
Acta PhysiologicaPlasminogen deficiency does not prevent sodium retention in a genetic mouse model of experimental nephrotic syndrome[Pubmed: 32455507]
Evaluation of The Relationship Between Apelin 36 and Oxidative Stress In Patients With General Anxiety Disorder[]